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NIBSC 抗PT S2亞基單克隆抗體3A12

產(chǎn)品時(shí)間:2022-03-04

簡(jiǎn)要描述:

NIBSC 99/536 抗PT S2亞基單克隆抗體3A12(標(biāo)準(zhǔn)品)材料 3A12 是一種與百日咳毒素 S2 亞基反應(yīng)的單克隆抗體。用于生產(chǎn)單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞系由日本東京國(guó)立傳染病研究所的 H. Sato 博士和 Y. Sato 博士建立。
它用作鑒定百日咳毒素的研究試劑。


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非 WHO 參考材料

抗 PT S2 亞基單克隆抗體 3A12

NIBSC 99/536


酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎細(xì)胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯DNA大小為100-150kb
二.甲酰胺解聚法:破碎細(xì)胞同上,然后用高濃度甲酰胺解聚蛋白質(zhì)與DNA的結(jié)合,再透析獲得DNA可得DNA200kb左右。
三.玻璃棒纏繞法:用鹽酸胍裂解細(xì)胞,將裂解物鋪于乙醇上,然后用帶鉤或U型玻璃棒在界面輕攪,DNA沉淀液繞于玻棒。生成DNA約80kb。
四.異丙醇沉淀法:基本同1法,僅用二倍容積異丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在異丙醇中可溶狀態(tài))
五.表面活性劑快速制備法:用Triton X-100A或NP40表面活性劑破碎細(xì)胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。
六.加熱法快速制備:加熱96℃-100℃,五分鐘,然后離心后取上清,可用于PCR反應(yīng)。
七.堿變性快速制備:先用NaOH作用20分鐘,再加HCI中和,離心后取上清,含少量DNA。

 


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